2 resultados
Resultados de la búsqueda
Mostrando 1 - 2 de 2
Ítem Identificación In - silico e In - vitro de genes housekeeping en raíces de Cecropia angustifolia(Universidad Icesi, 2024-06-12) Bacca Jaramillo, Laura Nathalia; Vivas Moncayo, Juan Esteban; Montoya Peláez, Guillermo LeónIn order to contribute to the exploitation of the chemical potential of diversity in the tropical region of the Colombian Andes, the natural products research laboratory at Icesi University has been working with Cecropia angustifolia, focusing special attention on its pentacyclic triterpene acids (TPAs), which are recognized as its chemotaxonomic markers. However, the metabolic pathways in this particular genus have not been studied in depth, so analyses of the enzymatic processes for the production of its metabolites must be based on models corresponding to different species. These models are inherently variable given the differences between each species and C. angustifolia. Therefore, a process of understanding the plant's metabolic processes must begin with the identification of housekeeping genes (HK) that can serve as biological markers and provide a reliable reference for comparing gene expression under different environmental conditions and/or tissues. Thus, the objective of this project was to evaluate the genes encoding the GAPDH, ACT, and TUB proteins as possible housekeeping genes, using bioinformatics tools, molecular techniques, and in vitro cultures of C. angustifolia root tissues. To achieve this objective, a literature review of the GAPDH, ACT, and TUB genes present in species taxonomically close to C. angustifolia was conducted. Then, specific primers for each gene were designed using different bioinformatics tools, followed by in vitro validation using mRNA extracted from C. angustifolia tissues. The obtained results were verified by Sanger sequencing, which found the presence of molybdopterin biosynthesis protein and the TUB gene (β - tubulin) in the tissue sample used. The results reported in the present investigation require further depth and serve as a basis for future research on the characterization of HK genes in C. angustifolia.Ítem Localización histológica de triterpenos en raíces silvestres e in - vitro de Cecropia angustifolia(Universidad Icesi, 2024-06-12) Muñoz Bonilla, Paula Catherine; Vivas Moncayo, Juan Esteban; Montoya Peláez, Guillermo LeónLos triterpenos pentacíclicos ácidos (TPAs) son productos naturales de gran interés debido a su potencial terapéutico en la diabetes mellitus tipo 2. Estos están presentes en la especie Cecropia angustifolia , principalmente en sus raíces. Aunque se conoce su capacidad de biosíntesis , hay una falta de conocimiento sobre el almacenamiento y localización de estos compuestos en el tejido vegetal. Es por esto que se diferenció la ubicación de TPA a partir de muestras de tejido radicular in vitro y silvestre de C . Angustifolia . Este proceso implicó establecer protocolos de tinción, centrados en procesos de análisis morfológico, derivatización de TPAs y tinción compar ativa con Sudan III, a partir de la visualización por microscopía óptica y de fluorescencia; verifi cando por espectrometría de masas las zonas con fluorescencia diferencial. Los protocolos obtenidos fueron desarrollados en muestras radiculares obtenidas de diferentes tratamientos . Se determinaron las principales estructuras radiculares a partir de la ob servación de la tinción con Safranina y Fast Green, además de localizar las zonas derivatizadas con fluorescencia diferencia l , utilizando ambos métodos de microscopía. S e determinó que el córtex radicular era la estructura que presentaba zonas de acumulación de TPAs. La verificación de estas zonas por espectrometría de masas indicó la presencia de moléculas de 706, 713 y 729 m/z, correspondiendo a las masas de los TPAs derivatizados y sus aductos de sodio. Además, la tinción con Sudan III mostró una presencia generalizada de lípidos en el tejido radicular. El protocolo establecido fue exitoso para la determinación de las zonas de acumulaci ón en raíces con diferentes tratamientos a partir de procesos de tinción y derivatización, así como su verificación por espectrometría de masas .