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Ítem Optimización de embriogénesis somática en zephyranthes carinata(Universidad Icesi, 2017-01-01) Gómez Restrepo, Maria Camila; Buitrago González, María Eugenia; Asesor Tesis; Asesor TesisLa familia Amaryllidaceae tiene la capacidad de producir una gran diversidad de alcaloides. En varios estudios, se ha encontrado que la mayoría de las especies vegetales de esta familia pueden producir alcaloides con gran potencial farmacológico para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas como son el Alzheimer, y diferentes tipos de cáncer. Sin embargo, su producción es baja lo cual ha sido una limitante para las investigaciones y su uso comercial a gran escala. Dentro de esta familia se encuentra Zephyranthes carinata, especie de uso ornamental en Colombia, con amplia distribución en la región andina, no se encuentra amenazada, y se puede adquirir fácilmente por venta comercial en viveros. Estos atributos permiten seleccionarla como especie piloto para el establecimiento de protocolos que luego puedan ser aplicados a otras especies silvestres de la familia. En el presente trabajo se estableció un protocolo de inducción de callo embriogénico en Zephyranthes carinata, con el fin de escalar en un futuro la producción de alcaloides en biorreactores.Ítem Expresión y determinación de la actividad enzimática de la tirosina descarboxilasa (TYDC) en E. coli BL21 (DE3) para la biosíntesis de p-tiramina a partir de l-tirosina(Universidad Icesi, 2022-12-07) Cuero Montalvo, Kevin Stiven; Barrera Ocampo, Álvaro Andrés; Caicedo Burbano, Paola Andrea; Asesor Tesis; Asesor TesisLa Tirosina Descarboxilasa (TyDC) constituye una enzima de gran relevancia en la biosíntesis de alcaloides en plantas de la familia de las Amarilidáceas, entre estos tenemos la licorina. Con ello, se lleva a cabo la expresión genética y determinación de los parámetros cinéticos de la Tirosina Descarboxilasa en E. coli BL21 (DE3) de manera in vitro, para la biosíntesis de p-tiramina. Inicialmente, se empleó el clúster genético pM20-tdcA, que, en principio, tiene el gen codificante de la enzima. Se transformó genéticamente a E. coli BL21 (DE3). Se validó la presencia del gen mediante la técnica molecular de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) y Secuenciación Automatizada de Sanger. Con lo anterior, se hipotetiza que las condiciones de expresión génica de dicha enzima, podría corresponder a 0.3 mM de IPTG, 14°C a 6h. Igualmente, se estima que la concentración de enzima en los extractos bacterianos de 0.0367, 0.0343 y 0.0218 mg/mL para las fracciones correspondiente al Extracto Total de Proteínas (ETP), Lisado Clarificado (LC) y Cuerpos de Inclusión (CI) respectivamente. Así se obtiene una constante catalítica (Kcat) de 0.397 s-1 , una velocidad máxima (Vmax) de 0.00197 mMs-1 , una constante de Michaelis-Menten de 14.6 mM y una Unidad de Actividad Específico del extracto bacteriano (U/mg) de 0.00937. La gran mayoría de estos parámetros, podrían estar asociados a la enzima en la célula y no de manera pura. Lo mencionado, permite obtener resultados experimentales de carácter bioquímico y molecular de dicha enzima, para su posterior implementación en una fábrica biológica funcional.Ítem Evaluación de la producción in vitro de alcaloides a partir de bulbillos de zephyranthes carinata utilizando el sistema de inmersión temporal(Universidad Icesi, 2017-01-01) Barragan Anzola , Isabela; Buitrago González, María Eugenia; Asesor Tesis; Asesor TesisLa familia de las amarilidáceas se caracteriza por producir metabolitos secundarios conocidos como alcaloides, que tienen propiedades farmacológicas para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas como son el Alzheimer, y diferentes tipos de cáncer. Además, esta familia tiene como característica presentar flores estrelladas y llamativas que las hacen ideales para el uso ornamental . Dos obstáculos principales han limitado la investigación en esta familia; muchas especies se encuentra en vida de extinció n, y , por ot ro lado, la producción de alcaloides es baja en las plantas. Por lo tanto, se han evaluado nuevas metodologías que permitan aumentar la producción masiva de alcaloides, entre las cuales est á , el cultivo in vitro que permite la propagación y conservación de l material vegetal, y la adición de inductores químicos, que generan estímulos permitiendo una mayor producción de alcaloides.Ítem Evaluación del efecto del metil jasmonato y el ácido jasmónico en la liberación de alcaloides producidos in vitro en zephyranthes carinata(Universidad Icesi, 2016-01-01) Alisandre Valverde, Daniela; Restrepo Espinosa, Geraldine; Asesor Tesis; Asesor Tesis; Asesor TesisLa familia Amaryllidaceae es una de las familias que son ampliamente estudiadas debido a la producción casi exclusiva de alcaloides representativos y que han demostrado tener acciones farmacológicas para diferentes enfermedades crónicas e infecciosas que afligen a la población del siglo XXI. Los estudios en los cuales se evalúa el efecto de los metabolitos secundarios en el tratamiento de enfermedades han aumentado en los últimos años debido al potencial que representan los fármacos obtenidos a partir de material vegetal y a las nuevas técnicas analíticas que permiten la identificación y cuantificación de los metabolitos secundarios producidos por las plantas. Sin embargo, las bajas producciones de metabolitos secundarios dificultan el estudio y el desarrollo de nuevos fármacos.Ítem Optimización de la producción de alcaloides en Zephyranthes carinata por medio de organogénesis o embriogénesis somática in vitro(Universidad Icesi, 2017-01-01) Tofiño Badiel, María Camila; Restrepo Espinosa, Geraldine; Asesor Tesis; Asesor Tesis; Asesor TesisLas Amaryllidaceae son una familia de plantas que se caracterizan por producir alcaloides específicos de esta familia con propiedades farmacológicas importantes. Esta familia también es ampliamente conocida por el valor ornamental de sus flores llamativas. Muchas especies de esta familia, se encuentran amenazadas o en vía de extinción, de otra parte, se ha encontrado una baja producción de estos alcaloides en el material vegetal in vivo, por lo cual se ha limitado el estudio de los alcaloides de estas especies. En este contexto el cultivo in vitro puede ser una alternativa atractiva, por una parte para multiplicar y conservar diversas plantas sin afectar su disponibilidad en la naturaleza, y adicionalmente una fuente de material vegetal para incrementar la producción de alcaloides que pueden ser utilizados para estudios básicos con diferentes fines, entre los cuales se incluyen aquellos dirigidos a entender las posibles aplicaciones de estos alcaloides para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas . En este proyecto se usaron dos rutas de cultivo in vitro, la organogénesis y embriogénesis somática, en la especie Zephyranthes carinata, nativa de Colombia, México y Centroamérica y, presente en el Valle del Cauca en condiciones naturales y de venta en los viveros como ornamentaÍtem Optimización de las condiciones in vitro para la producción de alcaloides a partir de plántulas de Zephyrantes carinata (Amaryllidaceae)(Universidad Icesi, 2016-01-01) Chamorro Mondragón , Daniel Andrés; Lentini Gil, Zaida Josefina; Asesor Tesis; Asesor Tesis; Asesor TesisLa familia Amaryllidaceae, ha sido muy estudiada en los últimos años, debido a que muchas de sus especies presentan moléculas con potencial uso farmacológico llamadas alcaloides. Estas moléculas se derivan del metabolismo secundario de las plantas, y algunas de ellas han reportado usos medicinales como agentes antimalárico, analgésicos y terapéuticos frente a enfermedades neurodegenerativas como el Alzheimer. En Colombia, muchas especies se encuentran en peligro de extinción, lo cual ha sido una limitante frente al estudio selectivo de algunos individuos, como por ejemplo: Crinum kunthianum, Eucharis amazónica, E. grandiflora. Sin embargo, la especie Zephyranthes carinata, es una especie de fácil acceso, debido a que se puede encontrar en puntos comerciales y zonas rurales del territorio vallecaucano, además, al no ser una especie amenazada puede utilizarse como un modelo experimental adecuado.Ítem Cultivo in vitro de tejidos vegetales de plantas del género zephyranthes y evaluación de su producción de alcaloides.(Universidad Icesi, 2014-01-01) Peralta Navarro , Luis Alberto; Santaella Tenorio, Marcela; Asesor TesisThe Amaryllidaceae is a family of bulbous and perennial plants which have been widely known for their ornamental value. The study of this family in the last decade has increased; one reason is because of the large pharmaceutical potential that possesses the alkaloids present in these plants. Genres of this family found in the Valle del Cauca have been endangered due to habitat destruction such as Eucharis and Caliphruria (for example C. hartwegiana and C. subedentata). In addition, other genres like Phaedranasa, Sprekelia, Hippeastrum and Crinum. The Amaryllidaceae alkaloids reported in greater abundance are Licorine and Galantamine. The mechanism of action of these molecules is based on inhibition of the enzyme acetylcholinesterase, showing pharmaceutical use in neurodegenerative diseases such as Alzheimer's. Other alkaloids such Haemantamina, Vittatina and tazetina among others, have presented anti-inflammatory activity, antimalarial and antibacterialÍtem Caracterización química de alcaloides del género(Universidad Icesi, 2014-01-01) Escobar Fuertes, Andrea; Santaella Tenorio, Marcela; Asesor Tesis; Asesor TesisCon este proyecto de investigación se pretende contribuir al conocimiento químico en el género Zephyranthes, un grupo de plantas que pertenece a la familia Amaryllidacea encontradas en algunas regiones de Colombia, al establecer un perfil de metabolitos secundarios conformado principalmente por un conjunto de alcaloides estructuralmente relacionados de los cuales no se tenía información reportada. Para el desarrollo de este proyecto, se analizaron 28 muestras provenientes de Cali, Tuluá, Popayán, Ibagué y Barranquilla, a las cuales se les realizó una caracterización cualitativa mediante la técnica cromatográfica UPLC acoplada a un detector PDA, para la separación e identificación de estos marcadores quimiotaxonómicos. Por medio de este análisis químico se logró la creación de la primera biblioteca de espectros UV de la familia Amaryllidacea mediante la cual se pudo establecer un perfil de alcaloides y los componentes principales encontrados entre los diferentes orígenes de los cuales proviene el material vegetal. La biblioteca se encuentra constituida por 34 alcaloides donde la mayoría de estas moléculas son comunes entre todas las muestras, permitiendo concluir que sin importar el lugar de donde se recolectaron estas plantas, comparten algunos de sus componentes químicos.Ítem Evaluación de la presencia de alcaloides en la rana eleutherodactylus johnstonei(Universidad Icesi, 2014-01-01) Hernández Córdoba, David; Castaño Valencia, Rafael Santiago; Asesor TesisEn la piel de los anfibios venenosos se han reportado una gran variedad de compuestos entre los que se incluyen esteroides, aminas, proteínas, péptidos y alcaloides. Para el caso de los alcaloides estos se diferencian de los demás compuestos en que no son sintetizados de novo por los anfibios sino obtenidos a partir de la dieta. Sin embargo se ha reportado que en algunos casos los alcaloides obtenidos a nivel dietario, sufren pequeñas modificaciones en su estructura por medio de mecanismos presentes en las ranas que aun son desconocidos. A algunos de los alcaloides bio-acumulados por los anfibios en su piel se les ha atribuido la mayoría de los efectos tóxicos y se han hecho propuestas de modificaciones mediante química combinatoria para desarrollar nuevos compuestos semisintéticos con propiedades fisicoquímicas y farmacológico-terapéuticas a partir de estos alcaloides de origen anfibio. De forma relativamente reciente Eleutherodactylus johnstonei una rana proveniente de las Antillas entro a territorio colombiano y se convirtió en una especie invasora, es una rana de colores crípticos sin señales de advertencia (aposematismo). En un estudio en Cuba se encontró que algunas especies de ranas del genero Eleutherodactylus presentan alcaloides en su piel, por lo cual se espera que E. johnstonei pueda tenerlos tambiénÍtem Aproximación bioinformática y molecular de la ruta de síntesis de los alcaloides mayoritarios en las especies locales zephyranthes carinata y zephyranthes rosea.(Universidad Icesi, 2014-01-01) Hernández Palomino, Diana Marcela; Santaella Tenorio, Marcela; Asesor TesisLa familia Amaryllidaceae comprende un grupo de plantas herbáceas caracterizadas por tener un amplio uso ornamental por ser plantas muy diversas en cuanto a formas y colores, pero también por su capacidad de producir gran diversidad de alcaloides, los cuales son exclusivos de esta familia. Estos metabolitos secundarios tienen actividades farmacológicas importantes, tales como efectos antitumorales, antivirales, antiparasitarios y analgésicos. La mayor parte de las investigaciones que se han hecho sobre esta familia, se ha dirigido a la caracterización fitoquímica, mientras que los aspectos moleculares de la biosíntesis natural de los alcaloides no han sido caracterizados de forma clara y precisa. Lo que hasta el momento se ha reportado incluye la identificación de las enzimas biosintéticas PAL (Phenylalanine ammonia-lyase), TYDC (Tyrosine decarboxylase) y OMT (Catechol-O-methyltransferase), involucradas en la etapa inicial de la ruta. Adicionalmente en Colombia se encuentran los géneros Calicharis, Caliphruria, Crinum, Eucharis, Hippeastrum, Phaedranassa, Plagiolirion y Zephyranthes para los cuales no se han encontrado reportes acerca de la caracterización genética de estas enzimas.
